提关键能力否表达的第一步是检测月的基因是否转录出了mRNA。典例①(1)目的基因一载体连接物、载体一载体连接物和目的基因提关键能力目的基因连接物分离、纯化(2)载体一载体连接物目的基因一载体典例1A连接物、载体一载体连接物(3)启动子mRNA(4)EcoR I和【解析】目的基因主要指编码蛋白质的基因，A错误；目的基因的筛选与获BamH T取是实施基因工程的第一步，B正确；来白苏云金杆菌的Bt基因可作为【解析】(1)在基因表达载体的构建过程中用同种限制酶来切割目的基因培育转基因抗虫棉用到的目的基因，C正确：随着测序技术的发展，以及和质粒，使之产生相同的黏性末端，以利于DNA片段的连接。将切割后序列数据库和序列比对工具等的应用，越来越多的基因的结构和功能为的日的基因和质粒用DNA连接酶进行连接，它们之问是随机连接的，可人们所知，这为科学家找到合适的目的基因提供了更多的机会和可能，D有三种产物：目的基因一载体连接物、载体一载体连接物和日的基因一目正确的基因连接物。获得DNA连接产物以后，必须通过筛选才能获得所需变式训练1B的基因表达载体，导入宿主细胞后才能表达获得基因产物。(2)从图中可【解析】基因a是目的基因，在体外扩增需要引物，在人体细胞中的复制也以看出，目的基因的插入位点在四环素抗性基因上，可推知目的基因一载需要，A错误；基因在人体细胞中表达产物是蛋白质a,而在细菌细胞中体连接物的四环素抗性基因被破坏，丧失了抗四环素的能力，但保留了抗的表达产物是蛋白质X,这说明人体细胞和细菌细胞中作为翻译模板的青霉素的能力；载休载休连接物既保留了抗四环素的能力也保留了抗RNA碱基序列不同，B正确；基因a在体外扩增时，利用高温打开DNA青霉素的能力：目的基因一日的基因连接物既无青霉素抗性基因也无四双链，C错误；基因a在体外扩增时，不需要测出基因a的所有脱氧核苷环素抗性基因，不具备抗性。(3)月的基因表达过程中，RA聚合酶首先酸序列，D错误。与启动子结合，指导日的基因转录产生mRNA,mRNA再指导蛋白质的典例2(1)同种限制酶或能产生相同末端的限制酶DNA连接酶合成。(4)从图中可看出四环素抗性基因上有两个不同的切割位点，所以(2)使目的基因在受体细胞中稳定存在且能遗传给下一代，同时，使目的在实际操作过程中，为避免切割后的末端任意连接，可用EcoR I和基因表达和发挥作用(3)RNA聚合酶(4)Ca2+能吸收周围环境中BamH「同时对目的基因和质粒进行切割，使同一切割产物的黏性木端DNA分子不同。【解析】(1)构建基因表达载体过程中，需要用同种限制酶或能产生相同末变武训练1C端的限制酶切割目的基因和载体，使目的基因和载体具有相同的末端，再【解析】EcoR T和BamH T的酶切位点位于目的基因的两侧，EcoR T和利用DNA连接酶将月的基因片段拼接到载体的切口处，形成重组DNABamH I的识别序列不同，用EcoR I和BamH I切割目的基因，可防止分子。(2)基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，其目的是使目的构建基因表达载体时目的基因自连，A正确：限制酶的作用是使特定部位基因在受体细胞中稳定存在且能遗传给下一代，同时，使日的基因表达和的两个核苷酸之间的磷酸二脂键断开，B正确；Sau3AI和BamHI识别发挥作用。(3)启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段，位于基因的的碱基序列不同，但Sa3AI和BamH I酶切目的基因，产生的黏性末端上游，它是RNA聚合酶识别与结合的位点，有了它才能驱动基因转录出相同，由于目的基因内部含有Sa3AI识别的序列，因此切割该DNA获mRNA。(4)如果要将此表达载体导入大肠杆菌细胞中，通常要用Ca2取目的基因时不能使用Sau3AI,C错误；Sau3AI和BamH T识别的序对大肠杆菌进行处理，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的列不同，BamH I酶识别的序列中包含S3AI识别的序列，但BamH I生理状态酶不能识别Sau3AI识别的序列，所以能被Sa3AI切割的序列不一定变武训练2c能被BamH I切割，ID正确。【解析】为防止酶切后目的基因和质粒自身连接成环状，图示对质粒和目典例2c的基因切割用到了两种限制酶，即PstI和EcoR I,A正确；抗卡那霉素【解析】质粒进人宿主细胞后不一定都要整合到染色体DNA上，如宿主基因作为标记基因，作用是筛选含有月的基因的受体细胞，B正确；限制细胞是细菌细胞则不需整合，A错误；质粒是小型环状双链DNA分子，酶SaI的识别序列位于目的基因内部，因此表达载体构建时不能用限而不是细胞器，也不会有碱基U,B、D错误。制酶SmaI,应用限制酶PstI、EcoR I,C错误；基因表达载体包括日的变武训练2A基因（抗原基因）、标记基因（抗卡那霉素基因）、启动子和终止子等，D【解析】作为载体必须具备的条件：一是在受体细胞中进行自我复制，或整正确合到受体细胞染色体DNA上，随染色体DNA进同步复制，即能在受奥例3(1)DNA的半保留复制四种脱氧核苷酸Taq DNA聚合酶体细胞巾稳定保存并大量复制，以使提供大量的外源DNA,A正确，D错(2)变性复性(3)不同2+1-25'3′(4)引物与模板②③误。二是其有一个至多个限制酶切点，以供外源DNA片段插入其中，B【解析】(I)PCR技术的原理是DNA的半保留复制。PCR反应中需要加错误。三是具有某些标记基因，以便重组DNA的鉴定和选择，C错误。入缓冲液、引物、模板DNA、四种悦氧核苷酸、DNA聚合酶(Tag DNA聚考点二基因工程的基本操作程序合酶)。(2)图中步骤1、2、3分别代表变性、复性、延伸，这三个步骤组成固必备知识一轮循环。(3)引物1和引物2的碱基序列不同。若一个DNA分子在PCR中经历n轮循环，理论上需要消耗2+1一2个引物，由引物形成子链①受体细胞性状②预期表达产物③蛋白质①已知结构和功能清晰的延伸方向是5'3'。(4)复性表示引物与模板相连，若复性温度过高会的基因⑤PCR⑥人工合成⑦半保留复制⑧目的基因两条链破坏引物与模板的碱基配对。PR反应得不到任何扩增产物，可能是复⑨DNA聚合酶⑩短单链核酸①90℃②50℃①⑤碱基互补配对性温度过高，导致引物与模板不能相连；或引物间相互配对，引物自连，不耐高温的IDNA聚合酶⑤5端向3端6短时间内大量扩增日的基能与模板相连，因此，可通过降低复性温度或重新设计引物进行改进。因⑦在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代⑧RNA聚合酶变武训练3D⑨转录⑩转录@目的基因②②同种限制酶或产生相同末端的限制酶【解析】从咽拭子采集样本获取RNA,再在逆转录酶的催化下，通过逆转⑧D八NA连接④农杆菌转化法⑤显微注射法④Ca2+转化法⑦受录合成cDNA,因此RT-PCR技术需要逆转录酶以及耐高温的精卵Tag DNA聚合酶，A止确：P(R扩增的原理是DNA的半保留复制，需要思维诊断两种引物和4种脱氧核苷酸，B正确；据题干信息“在P℃R复性过程中探1./2./针和引物一起与模板结合”可知，引物和探针都需与月的基因进行碱基互3.×【解析】一个基因表达载体含有启动子、终止子、标记基因和日的基补配对，C正确：如果待测样本中没有检测出荧光，初步断定样本中不含因等，没有密码子。有病毒，即被检测者可能没有感染病毒，D错误。4.考点三基因工程的应用与蛋白质工程5.×【解析】启动子是与RNA聚合酶识别和结合的部位，是一段有特殊序列结构的DNA片段，而起始密码子位于mRNA上.固必备知识6./①化学农药②抗原③工业发酵④改造或合成基因⑤改造了7.×【解析】基因表达包括转录和翻译两个过程，因此检测目的基因是⑥新的蛋白质⑦蛋白质结构⑧功能⑨蛋白质结构⑩氨基酸序列23XKA(新)·生物学-B版一XC·61·

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